Kemiluminescenčni imunski test, CLIA, je zelo občutljiva imunska tehnika.
1. Načelo
Kemiluminescenčni imunski test združuje specifičnost imunskega odziva in visoko občutljivost kemiluminiscence. Njegovo osnovno načelo je kombinacija specifičnega imunskega odziva med antigenom in protitelesom s kemiluminiscenčno reakcijo. Natančneje, antigen v vzorcu, ki ga je treba testirati, se združi s specifičnim protitelesom in tvori imunski kompleks. Nato s serijo kemičnih reakcij imunski kompleks proizvede kemiluminiscenčni signal. Intenzivnost luminiscence je sorazmerna s koncentracijo antigena, ki ga je treba testirati, vsebnost antigena, ki ga je treba testirati, pa je mogoče kvantitativno analizirati z zaznavanjem intenzivnosti luminiscence.
2. Glavne komponente
Protitelesa: vključno s protitelesi za zajemanje in protitelesi za odkrivanje. Zajemno protitelo je običajno fiksirano na nosilcu trdne faze, da zajame antigen, ki ga je treba testirati. Detekcijsko protitelo se kombinira s kemiluminiscenčnim markerjem za odkrivanje antigena v imunskem kompleksu.
Nosilec v trdni fazi: kot so mikroplošče, magnetne kroglice itd., ki se uporabljajo za fiksiranje zajemnega protitelesa za lažjo imunsko reakcijo ter ločevanje in pranje.
Kemiluminiscenčni marker: običajno snov, ki lahko proizvede luminiscenčni signal v kemijski reakciji, kot je luminol, akridinijev ester itd. Marker se združi z detekcijskim protitelesom, da proizvede kemiluminiscenčni signal po imunski reakciji.
Sistem zaznavanja: vključno z opremo, kot so detektorji luminescence, ki se uporabljajo za zaznavanje intenzivnosti kemiluminiscenčnih signalov in njihovo pretvorbo v berljive vrednosti.
3. Lastnosti
Visoka občutljivost: Zazna lahko izredno nizke koncentracije preskusne snovi, ki je običajno za nekaj velikosti bolj občutljiva od tradicionalnih imunskih metod.
Široko linearno območje: Vsebnost preskusne snovi je mogoče natančno izmeriti v širokem območju koncentracij brez večkratnih razredčitev.
Močna specifičnost: Na podlagi specifične vezave antigena in protiteles je zelo selektiven za specifične testne snovi.
Hitro: Postopek odkrivanja je relativno hiter in rezultate je na splošno mogoče dobiti v krajšem času.
Visoka stopnja avtomatizacije: primeren je za odkrivanje obsežnih vzorcev in se lahko uporablja v povezavi z avtomatiziranimi instrumenti za izboljšanje učinkovitosti odkrivanja.
4. Področja uporabe
Klinična diagnoza: Uporablja se za odkrivanje različnih biomarkerjev, kot so tumorski markerji, hormoni, markerji nalezljivih bolezni itd., da zagotovi pomembno osnovo za diagnozo bolezni, spremljanje zdravljenja in oceno prognoze.
Razvoj zdravil: Uporablja se za spremljanje koncentracij zdravil, vrednotenje učinkovitosti in raziskave metabolizma zdravil.
Testiranje varnosti živil: Odkrivanje škodljivih snovi, ostankov pesticidov, ostankov veterinarskih zdravil itd. v živilih.
Okoljski monitoring: Odkrivanje onesnaževal in strupenih snovi v okolju.